عد وحساب كريات الدم Blood cell count

كثيراً ما تدعو الحاجة إلى معرفة عدد الكريات الدموية الحمراء وكذلك البيضاء . ويمكن إنجاز ذلك على الرغم من كثرة عدد الكريات الدموية بسهولة نسبية وذلك بطريقة التخفيف.
لقد شاع في السنوات الأخيرة استعمال أجهزة إلكترونية لعد الكريات الدموية الحمراء والبيضاء ، تدعى بحاسبة الخلايا الدموية blood cell counter توضع فيها عينة الدم ويضغط على زر فتظهر أرقام تمثل عدد الكريات الدموية الحمراء والبيضاء في الملليمتر المكعب الواحد .
ولكن الجهاز الكلاسيكي والذي لا يزال يستخدم في أكثر المختبرات هو مقياس الخلايا الدموية Haemocytometer . يتألف الجهاز من ماصتين إحداها ذات خرزة حمراء تستعمل لتخفيف الدم عند عد كريات الدم الحمراء . لاحظ وجود التقسيمات ابتداءاً من نهاية الماصة إلى أعلاها : 0.5 ، 1 ، 101 . وهذه الأرقام تمثل حجم الفراغ داخل الماصة بالملليمترات المكعبة .أما الماصة الأخرى فتحتوي على خرزة بيضاء وهي تستخدم لتخفيف الدم عند عد الخلايا الدموية البيضاء . لاحظ التقسيمات التالية 0.5 ، 1، 11 وهي أيضاً بالملليمترات المكعبة . توجد أيضاً في الجهاز قطعة متصلة بأنبوبة مطاطية تستخدم لسحب الدم إلى داخل الماصتين . أهم جزء في الجهاز هو صندوق العد counting chamber والذي هو عبارة عن شريحة زجاجية سميكة توجد في مسرحها الوسطي تقسيمات مـــــربعة مجهــــــرية . هذه التقسيمات ثــــلاثة أنــــواع هي المربع

شكل شريحة عد خلايا الدم

تقسيم الشريحة بحسب مكان عد خلايا الدم ( w = بيضاء و r = حمراء )

الكبير والذي يقسم إلى 25 مربع متوسط وكل مربع متوسط مقسم بدوره إلى 16 مربع صغير أي أن هناك ( 16 X 25 ) 400 مربع صغير في المربع الكبير .
قبل كل شيء نظف الشريحة وافحصها تحت القوة المجهرية الصغرى لتتعرف على المربع الكبير والمربعات المتوسطة والمؤلفة من 16 مربع صغير . لاحظ بأن الحدود الخارجية للمربع المتوسط مؤلفة من ثلاثة خطوط أما المربعات الصغيرة مفصولة عن بعضها بخطوط مفردة فقط .
طريقة الحساب :
مربع الحساب = 25 مربعاً صغيراً في كل منها مربع أصغر = 400 مربع .
مساحة كل مربع من هذه المربعات = 1/2 * 1/2 = 1/400 مم2 .
الإرتفاع من غطاء الشريحة = 0.1 مم
- القانون العام لعد كريات الدم = عدد كريات الدم في المربعات / ( عدد المربعات X الحجم X التخفيف )

جهاز نيوياور Newyauer :
- عد كريات الدم الحمراء
16 مربع صغير في 5 مربعات متوسطة = مجموع كريات الدم الحمراء ( س )
عدد كريات الدم في 80 مربع = س
عدد كريات الدم الحمراء = س/ 80 X 4000 X 200
- لعد كريات الدم البيضاء
16 مربع كبير في كل 4 مربعات متوسطة = مجموع كريات الدم البيضاء ( ب ) 64 = ب
حجم كل مربع= 1/4 X 1/4 X 0.1 = 160
عدد كريات الدم البيضاء = ب/ 64 X 160 X 20
طريقة العمل :
أ - عد كريات الدم الحمراء RBC:
1 – نظف ثم جفف الماصة ذات الخرزة الحمراء .
2 – اسحب كمية من الدم حتى العلامة 0.5 إذا ارتفع الدم عن هذه العلامة تخلص من الزيادة بوضع قطعة من ورق نشاف عند طرف الماصة .
3 – جفف طرف الماصة جيداً ثم ضعها في سائل التخفيف ( 0.9% محلول فسيولوجي ) وامتص كمية من هذا السائل حتى العلامة 101 .
4 – افصل الأنبوبة المطاطية ثم امسك طرف الماصة بواسطة إصبعي السبابة والإبهام ثم اخلط الدم بالمحلول المخفف جيداً بتحريك الماصة بين الإصبعين لمدة دقيقة تقريباً .

طريقة عد خلايا الدم على المجهر

5 – تخلص من أول قطرتين باستخدام ورق نشاف , ثم ضع قطرة من الدم المخفف على شريحة العد في جهاز الهيموسيتوميتر ، ثم غطي الشريحة بغطائها الزجاجي مع تجنب دخول فقاعات هوائية تحت الغطاء لأن ذلك يحدث خطأ في العد .
ملاحظة : اترك العينة على الشريحة لمدة دقيقتين حتى تتوزع الخلايا على الشريحة جيداً .

6– عد كريات الدم الحمراء الموزعة في خمس مربعات متوسطة متتالية على أن يتم عد كريات الدم الحمراء الموزعة داخل المربع المتوسط إلى جانب عد الكريات الموجودة على الضلع الأيسر والأسفل من هذا المربع وإهمال ما يوجد من كريات دموية على الضلع الأيمن والعلوي . أي يكون العد على الحواف التي تشبه شكل حرف L . ثم احسب متوسط ما يوجد في كل مربع .

ب - عد كريات الدم البيضاء WBC :
اتبع نفس الطريقة السابقة المستعملة في عد كريات الدم الحمراء ما عدا الفروق التالية :
1 – نظف ثم جفف الماصة ذات الخرزة البيضاء .
2 – اسحب كمية من الدم حتى العلامة 0.5 ثم اسحب كمية من هذا السائل المخفف حتى العلامة 11.
3 – استعمل محلول مخفف من صبغة الجينشيان البنفسجي 1% في حمض الخل ، يقوم هذا المحلول بتحليل الكريات الدموية الحمراء جميعها ويصبغ في نفس الوقت أنوية الخلايا الدموية البيضاء وبذلك يسهل تميزها.
4 - يحسب عدد كريات الدم البيضاء في 64 مربع صغير الموجودة على أطراف الشريحة الخاصة بعد الكريات الدموية .
- يحسب متوسط عدد الكريات الدموية البيضاء الموجودة في مربع واحد .
- ليكن عدد الكريات الدموية المحسوبة في 64 مربع = ص
- متوسط عدد الكريات الدموية في المربع الواحد
( س ) = ص/ 64
- عدد الكريات الدموية البيضاء في الدم الأصلي /سم3 =
س X 160 X 20 ( التخفيف )